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调试好视频测量显微镜才能得要精准数据

时间:2023-03-01       点击次数:609
  视频测量显微镜被称为“视频”,因为它将传统的显微镜与摄像系统、显微镜或计算机相结合,这使得显微镜的观察结果能够以数据的形式长期存储。今天的显微镜非常强大。它的智能化、人性化和可扩展性使视频测量显微镜非常受欢迎。那么视频测量显微镜应该如何调试呢?让我们来看看。

  1、在正式试验过程中,应分别采用阳性对照和阴性对照控制试验条件,并将试验样品一式两份,以确保试验结果的准确性。有时背景较高,表明存在非特异性反应,可以用羊血清、兔血清或BSA阻断。

 

  2.在ELISA中,各种实验条件的选择非常重要,包括:

  (1) 固体载体的选择:许多物质可用作固体载体,如PVC、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺和纤维素。形式可以是凹板、试管、珠等,目前常用的是40孔聚苯乙烯凹板。无论是哪种载体,都可以在使用前进行筛选:用相同量的抗原包被,在相同的实验条件下反应,观察其颜色反应是否均匀,判断其吸附性能是否良好。

  (2) 涂层抗体(或抗原)的选择:当抗体(或抗体)吸附在固体载体表面时,要求纯度良好,PH值通常要求在9.0至9.6之间。吸附温度、时间和蛋白质含量也有一定影响,一般为4℃18-24小时。需要滴定蛋白质涂层的适当浓度:不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μG/ml等),在其他测试条件相同的情况下观察阳性样品的OD值。选择OD值高、蛋白质含量低的浓度。大多数蛋白质通常为1~10μg/ml。

  (3) 酶标抗体工作浓度的选择:首先,用直接ELISA滴定初始滴度(见酶标抗体部分)。然后固定其他条件或使用“方阵法”(涂层的不同稀释度、待测样品的参考物和酶标记抗体)在正式实验系统中准确滴定其工作浓度。

  (4) 酶底物和供氢体的选择:供氢体选择的要求便宜、安全、显色反应明显,但无色。一些氢供体(如OPD等)具有潜在的致癌作用,应予以保护。合格者应使用非致癌和敏感的氢供体,如TMB和ABTS,这些供体目前相对令人满意。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱终止反应。通常,基材作用时间为10-30分钟。

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